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模型制备

白色念珠菌感染阴道炎模型

2020年06月02日 浏览量: 评论(0) 来源:《人类疾病动物模型复制方法学》 作者:周光兴 责任编辑:yjcadmin

念珠菌性阴道炎(Candida albicans vaginitis)是一种育龄妇女常见的阴道黏膜真菌感染性疾病,临床上85%~95%的外阴性阴道炎由白色念珠菌(Candida albicans)引起。白色念珠菌为阴道和肠道共生菌,也是条件致病菌,75%的育龄妇女至少患过一次由此菌感染引起的阴道炎,更值得引起关注的是其中有5%~10%的妇女为复发性外阴阴道念珠菌病。临床上妇女念珠菌菌性阴道炎常和使用抗生素、口服避孕药、怀孕及糖尿病有关。国外构建念珠菌菌性阴道炎的动物模型已有较长时间,采用的模型动物主要包括小鼠和大鼠等,通常情况下实验动物假发情状态对于本模型的复制是一个必要条件。有研究报道,在制作大鼠阴道炎模型时首先将大鼠的卵巢摘除,然后再给以外源性雌激素造成其假发情状态;在假发情状态下,动物阴道黏膜糖原分泌量增加,阴道内 pH值下降,这样的环境有利于念珠菌生长从而达到造模的目的。而小鼠由于其体型较小,则通常采取直接使用外源性雌激素皮下注射来制备模型。

(1)复制方法  年龄为8~10周龄ICR雌性小鼠,在接种前6d开始每只小鼠皮下注射0.05ml含有0.1mg苯甲酸雌二醇的油剂,以后每2d注射1次。将已分离纯化的白色念珠菌菌株接种在含1%蛋白胨和0.1%葡萄糖的液体培养基,25℃水浴振荡培养16~18h,制成细菌密度为2.5×1000000CFU/ml的菌悬液。将20μl菌悬液(即白色念珠菌菌孢子接种量为5×10000个)在接种日注入小鼠阴道内。自第2日开始,小鼠阴道内即有高水平的白色念珠菌,自第4日起小鼠阴道灌洗液涂片染色可见到较多芽生孢子和假菌丝,第7日起可见成团的菌丝,并可见以中性粒细胞为主的炎性改变。

(2)模型特点  本模型注射苯甲酸雌二醇油剂造成小鼠假发情状态来制备白色念珠菌感染小鼠模型,结果阴道黏膜浅层出现念珠菌的生长繁殖,出现类似于外阴阴道念珠菌病妇女的症状。此模型操作简单,重复性好,可达到100%的感染。

(3)比较医学  白色念珠菌是人体正常菌群之一,通常情况下白色念珠菌不致病,糖尿病或长期使用肾上腺皮质激素、口服避孕药等妇女好发念珠菌性阴道炎,大多数患者在月经后的黄体期加重或复发,而此时妇女体内的雌激素水平最高。念珠菌性阴道炎表现为阴道壁充血、水肿,阴道分泌物浓稠、乳酪样、豆腐渣样等病变。注射苯甲酸雌二醇油剂造成假发情状态小鼠,接种白色念珠菌后,显示接种后第4日阴道腔内出现芽生孢子或菌丝团,并持续至观察期末,阴道腔内可见到大量的多形性粒细胞,阴道黏膜及黏膜下也见到以多形性粒细胞为主的炎症细胞浸润。同时小鼠的外阴红肿,阴道腔内有豆渣样分泌物,出现类似于外阴阴道念珠菌病妇女的症状。


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