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生物安全实验室分级

2021年02月05日 浏览量: 评论(0) 来源:《医学动物实验技术》 作者:魏泓 主编 责任编辑:yjcadmin

我国主要根据对所操作生物因子采取的防护措施,将实验室生物安全防护水平分为一级、二级、三级和四级,一级防护水平最低,四级防护水平最高。依据中华人民共和国国家标准《实验室生物安全通用要求》(GB19489-2008)规定:

生物安全防护水平为一级的实验室适用于操作在通常情况下不会引起人类或者动物疾病的微生物;

生物安全防护水平为二级的实验室适用于操作能够引起人类或者动物疾病,但一般情况下对人、动物或者环境不构成严重危害,传播风险有限,实验室感染后很少引起严重疾病,并且具备有效治疗和预防措施的微生物;

生物安全防护水平为三级的实验室适用于操作能够引起人类或者动物严重疾病,比较容易直接或者间接在人与人、动物与人、动物与动物间传播的微生物;

生物安全防护水平为四级的实验室适用于操作能够引起人类或者动物非常严重疾病的微生物,以及我国尚未发现或者已经宣布消灭的微生物。

以BSL-1、BSL-2、BSL-3、BSL-4(bio-safety level, BSL)表示仅从事体外操作的实验室的相应生物安全防护水平。以ABSL-1、ABSL-2、ABSL-3、ABSL-4(animal bio-safety level, ABSL)表示包括从事动物活体操作的实验室的相应生物安全防护水平。

同时该标准根据实验活动的差异、采用的个体防护装备和基础隔离设施的不同,将实验室分为以下情况:

1.操作通常认为非经空气传播致病性生物因子的实验室。

2.可有效利用安全隔离装置(如:生物安全柜)操作常规量经空气传播致病性生物因子的实验室。

3.能有效利用安全隔离装置操作常规量经空气传播致病性生物因子的实验室。

4.利用具有生命支持系统的正压服操作常规量经空气传播致病性生物因子的实验室。

在确定进行实验时,应根据危险度评估结果将微生物因子归入某一生物安全水平。当通过危险度评估确立适当的生物安全水平时,要考虑危险度等级以及其他一些因素。例如,归入危险度2级的微生物因子,在进行安全工作时通常需要二级生物安全水平的设施、仪器、操作和规程。但是,如果特定实验会产生高浓度的气溶胶时,则应将实验送到三级生物安全实验室内进行,因为三级生物安全实验室对实验产生的气溶胶能更好地进行保护,所以更适于提供所必需的生物安全防护。因此,在确定所从事特定工作的生物安全水平时,应根据危险度评估结果来进行专业判断,而不应单纯根据使用病原体的危险度等级来机械地确定所需的实验室生物安全水平。

一、基础实验室—生物安全一级实验室

生物安全一级实验室适用于具有以下特征的生物因子的操作:在通常情况下不会引起人类或者动物疾病的细菌、真菌、病毒和寄生虫等微生物,并且对实验室工作人员和环境的潜在危害性最小。

(一)对工作人员的要求

进入BSL-1实验室的工作人员要通过实验室操作程序培训,并由一位受过微生物学及相关科学一般培训的实验室工作人员监督管理。

(二)设施和设备要求

1.实验室的门应有可视窗并可锁闭,门锁及门的开启方向应不妨碍室内人员逃生。

2.应设洗手池,宜设置在靠近实验室的出口处。

3.在实验室门口处应设存衣或挂衣装置,可将个人服装与实验室工作服分开放置。

4.实验室的墙壁、天花板和地面应易清洁、不渗水、耐化学品和消毒灭菌剂的腐蚀。地面应平整、防滑,不应铺设地毯。

5.实验室台柜和座椅等应稳固,边角应圆滑。

6.实验室台柜等和其摆放应便于清洁,实验台面应防水、耐腐蚀、耐热和坚固。

7.实验室应有足够的空间和台柜等摆放实验室设备和物品。

8.应根据工作性质和流程合理摆放实验室设备、台柜、物品等,避免相互干扰、交叉污染,并应不妨碍逃生和急救。

9.实验室可以利用自然通风。如果采用机械通风,应避免交叉污染。

10.如果有可开启的窗户,应安装可防蚊虫的纱窗。

11.实验室内应避免不必要的反光和强光。

12.若操作刺激或腐蚀性物质,应在30m内设洗眼装置,必要时应设紧急喷淋装置。

13.若操作有毒、刺激性、放射性挥发物质,应在风险评估的基础上,配备适当的负压排风柜。

14.若使用高毒性、放射性等物质,应配备相应的安全设施、设备和个体防护装备,应符合国家、地方的相关规定和要求。

15.若使用高压气体和可燃气体,应有安全措施,应符合国家、地方的相关规定和要求。

16.应设应急照明装置。

17.应有足够的电力供应。

18.应有足够的固定电源插座,避免多台设备使用共同的电源插座。应有可靠的接地系统,应在关键节点安装漏电保护装置或监测报警装置。

19.供水和排水管道系统应不渗漏,下水应有防回流设计。

20.应配备适用的应急器材,如消防器材、意外事故处理器材、急救器材等。

21.应配备适用的通信设备。

22.必要时,应配备适当的消毒灭菌设备。

二、基础实验室—生物安全二级实验室

生物安全防护水平为二级的实验室适用于操作能够引起人类或者动物疾病,但一般情况下对人、动物或者环境不构成严重危害,传播风险有限,实验室感染后很少引起严重疾病,并且具备有效治疗和预防措施的微生物。

(一)对工作人员的要求

进入BSL-2实验室操作致病性流感病毒的实验室工作人员要经过特殊培训,并且在资深工作人员的指导下工作。

(二)设施和设备要求

1.适用时,应符合生物安全一级实验室的相关要求。

2.实验室主入口的门、放置生物安全柜实验间的门应可自动关闭;实验室主入口的门应有进入控制措施。

3.实验室工作区域外应有存放备用物品的条件。

4.应在实验室工作区配备洗眼装置。

5.应在实验室或其所在的建筑内配备高压蒸汽灭菌器或其他适当的消毒灭菌设备,所配备的消毒灭菌设备应以风险评估为依据。

6.应在操作病原微生物样本的实验间内配备生物安全柜。

7.应按产品的设计要求安装和使用生物安全柜。如果生物安全柜的排风在室内循环,室内应具备通风换气的条件;如果使用需要管道排风的生物安全柜,应通过独立于建筑物其他公共通风系统的管道排出。

8.应有可靠的电力供应。必要时,重要设备如培养箱、生物安全柜、冰箱等应配置备用电源。

三、防护实验室—生物安全三级实验室

生物安全防护水平为三级的实验室适用于操作能够引起人类或者动物严重疾病,比较容易直接或者间接在人与人、动物与人、动物与动物间传播的微生物。

(一)对工作人员的要求

实验人员应在处理致病性的和可能使人致死的病原方面受过专业训练,并由对该病原工作有经验的、有资格的科学工作者监督。

(二)设施和设备要求

1.平面布局

(1)实验室应明确区分辅助工作区和防护区,应在建筑物中自成隔离区或为独立建筑物,应有出入控制。

(2)防护区中直接从事高风险操作的工作间为核心工作间,人员应通过缓冲间进入核心工作间。

(3)适用于操作通常认为非经空气传播致病性生物因子的实验室辅助工作区应至少包括监控室和清洁衣物更换间;防护区应至少包括缓冲间(可兼作脱防护服间)及核心工作间。

(4)适用于可有效利用安全隔离装置(如:生物安全柜)操作常规量经空气传播致病性生物因子的实验室辅助工作区应至少包括监控室、清洁衣物更换间和淋浴间;防护区应至少包括防护服更换间、缓冲间及核心工作间。

(5)适用于可有效利用安全隔离装置(如:生物安全柜)操作常规量经空气传播致病性生物因子的实验室核心工作间不宜直接与其他公共区域相邻。

(6)如果安装传递窗,其结构承压力及密闭性应符合所在区域的要求,并具备对传递窗内物品进行消毒灭菌的条件。必要时,应设置具备送排风或自净化功能的传递窗,排风应经HEPA过滤器过滤后排出。

2.围护结构

(1)围护结构(包括墙体)应符合国家对该类建筑的抗震要求和防火要求。

(2)天花板、地板、墙间的交角应易清洁和消毒灭菌。

(3)实验室防护区内围护结构的所有缝隙和贯穿处的接缝都应可靠密封。

(4)实验室防护区内围护结构的内表面应光滑、耐腐蚀、防水,以易于清洁和消毒灭菌。

(5)实验室防护区内的地面应防渗漏、完整、光洁、防滑、耐腐蚀、不起尘。

(6)实验室内所有的门应可自动关闭,需要时,应设观察窗;门的开启方向不应妨碍逃生。

(7)实验室内所有窗户应为密闭窗,玻璃应耐撞击、防破碎。

(8)实验室及设备间的高度应满足设备的安装要求,应有维修和清洁空间。

(9)在通风空调系统正常运行状态下,采用烟雾测试等目视方法检查实验室防护区内围护结构的严密性时,所有缝隙应无可见泄漏(参见附录3)。

3.通风空调系统

(1)应安装独立的实验室送排风系统,应确保在实验室运行时气流由低风险区向高风险区流动,同时确保实验室空气只能通过HEPA过滤器过滤后经专用的排风管道排出。

(2)实验室防护区房间内送风口和排风口的布置应符合定向气流的原则,利于减少房间内的涡流和气流死角;送排风应不影响其他设备(如:11级生物安全柜)的正常功能。

(3)不得循环使用实验室防护区排出的空气。

(4)应按产品的设计要求安装生物安全柜和其排风管道,可以将生物安全柜排出的空气排入实验室的排风管道系统。

(5)实验室的送风应经过HEPA过滤器过滤,宜同时安装初效和中效过滤器。

(6)实验室的外部排风口应设置在主导风的下风向(相对于送风口),与送风口的直线距离应大于12m,应至少高出本实验室所在建筑的顶部2m,应有防风、防雨、防鼠、防虫设计,但不应影响气体向上空排放。

(7)HEPA过滤器的安装位置应尽可能靠近送风管道在实验室内的送风口端和排风管道在实验室内的排风口端。

(8)应可以在原位对排风HEPA过滤器进行消毒灭菌和检漏。

(9)如在实验室防护区外使用高效过滤器单元,其结构应牢固,应能承受2500Pa的压力;高效过滤器单元的整体密封性应达到在关闭所有通路并维持腔室内的温度在设计范围上限的条件下,若使空气压力维持在1000Pa时,腔室内每分钟泄漏的空气量应不超过腔室净容积的0.1%。

(10)应在实验室防护区送风和排风管道的关键节点安装生物型密闭阀,必要时可完全关闭。应在实验室送风和排风总管道的关键节点安装生物型密闭阀,必要时可完全关闭。

(11)生物型密闭阀与实验室防护区相通的送风管道和排风管道应牢固、易消毒灭菌、耐腐蚀、抗老化,宜使用不锈钢管道;管道的密封性应达到在关闭所有通路并维持管道内的温度在设计范围上限的条件下,若使空气压力维持在500Pa时,管道内每分钟泄漏的空气量应不超过管道内净容积的0.2%。

(12)应有备用排风机。应尽可能减少排风机后排风管道正压段的长度,该段管道不应穿过其他房间。

(13)不应在实验室防护区内安装分体空调。

4.供水与供气系统

(1)应在实验室防护区内的实验间的靠近出口处设置非手动洗手设施;如果实验室不具备供水条件,则应设非手动手消毒灭菌装置。

(2)应在实验室的给水与市政给水系统之间设防回流装置。

(3)进出实验室的液体和气体管道系统应牢固、不渗漏、防锈、耐压、耐温(冷或热)、耐腐蚀。应有足够的空间清洁、维护和维修实验室内暴露的管道,应在关键节点安装截止阀、防回流装置或HEPA过滤器等。

(4)如果有供气(液)罐等,应放在实验室防护区外易更换和维护的位置,安装牢固,不应将不相容的气体或液体放在一起。

(5)如果有真空装置,应有防止真空装置的内部被污染的措施;不应将真空装置安装在实验场所之外。

5.污物处理及消毒灭菌系统

(1)应在实验室防护区内设置生物安全型高压蒸汽灭菌器。宜安装专用的双扉高压灭菌器,其主体应安装在易维护的位置,与围护结构的连接之处应可靠密封。

(2)对实验室防护区内不能高压灭菌的物品应有其他消毒灭菌措施。

(3)高压蒸汽灭菌器的安装位置不应影响生物安全柜等安全隔离装置的气流。

(4)如果设置传递物品的渡槽,应使用强度符合要求的耐腐蚀性材料,并方便更换消毒灭菌液。

(5)淋浴间或缓冲间的地面液体收集系统应有防液体回流的装置。

(6)实验室防护区内如果有下水系统,应与建筑物的下水系统完全隔离;下水应直接通向本实验室专用的消毒灭菌系统。

(7)所有下水管道应有足够的倾斜度和排量,确保管道内不存水;管道的关键节点应按需要安装防回流装置、存水弯(深度应适用于空气压差的变化)或密闭阀门等;下水系统应符合相应的耐压、耐热、耐化学腐蚀的要求,安装牢固,无泄漏,便于维护、清洁和检查。

(8)应使用可靠的方式处理处置污水(包括污物),并应对消毒灭菌效果进行监测,以确保达到排放要求。

(9)应在风险评估的基础上,适当处理实验室辅助区的污水,并应监测,以确保排放到市政管网之前达到排放要求。

(10)可以在实验室内安装紫外线消毒灯或其他适用的消毒灭菌装置。

(11)应具备对实验室防护区及与其直接相通的管道进行消毒灭菌的条件。

(12)应具备对实验室设备和安全隔离装置(包括与其直接相通的管道)进行消毒灭菌的条件。

(13)应在实验室防护区内的关键部位配备便携的局部消毒灭菌装置(如:消毒喷雾器等),并备有足够的适用消毒灭菌剂。

6.电力供应系统

(1)电力供应应满足实验室的所有用电要求,并应有冗余。

(2)生物安全柜、送风机和排风机、照明、自控系统、监视和报警系统等应配备不间断备用电源,电力供应应至少维持30分钟。

(3)应在安全的位置设置专用配电箱。

7.照明系统

(1)实验室核心工作间的照度应不低于350lx,其他区域的照度应不低于200lx,宜采用吸顶式防水洁净照明灯。

(2)应避免过强的光线和光反射。

(3)应设不少于30分钟的应急照明系统。

8.自控、监视与报警系统

(1)进入实验室的门应有门禁系统,应保证只有获得授权的人员才能进入实验室。

(2)需要时,应可立即解除实验室门的互锁;应在互锁门的附近设置紧急手动解除互锁开关。

(3)核心工作间的缓冲间入口处应有指示核心工作间工作状态的装置(如:文字显示或指示灯),必要时,应同时设置限制进入核心工作间的连锁机制。

(4)启动实验室通风系统时,应先启动实验室排风,后启动实验室送风;关停时,应先关闭生物安全柜等安全隔离装置和排风支管密闭阀,再关实验室送风及密闭阀,后关实验室排风及密闭阀。

(5)当排风系统出现故障时,应有机制避免实验室出现正压和影响定向气流。

(6)当送风系统出现故障时,应有机制避免实验室内的负压影响实验室人员的安全、影响生物安全柜等安全隔离装置的正常功能和围护结构的完整性。

(7)应通过对可能造成实验室压力波动的设备和装置实行连锁控制等措施,确保生物安全柜、负压排风柜(罩)等局部排风设备与实验室送排风系统之间的压力关系和必要的稳定性,并应在启动、运行和关停过程中保持有序的压力梯度。

(8)应设装置连续监测送排风系统HEPA过滤器的阻力,需要时,及时更换HEPA过滤器。

(9)应在有负压控制要求的房间入口的显著位置,安装显示房间负压状况的压力显示装置和控制区间提示。

(10)中央控制系统应可以实时监控、记录和存储实验室防护区内有控制要求的参数、关键设施设备的运行状态;应能监控、记录和存储故障的现象、发生时间和持续时间;应可以随时查看历史记录。

(11)中央控制系统的信号采集间隔时间应不超过1分钟,各参数应易于区分和识别。

(12)中央控制系统应能对所有故障和控制指标进行报警,报警应区分一般报警和紧急报警。

(13)紧急报警应为声光同时报警,应可以向实验室内外人员同时发出紧急警报;应在实验室核心工作间内设置紧急报警按钮。

(14)应在实验室的关键部位设置监视器,需要时,可实时监视并录制实验室活动情况和实验室周围情况。监视设备应有足够的分辨率,影像存储介质应有足够的数据存储容量。

9.实验室通信系统

(1)实验室防护区内应设置向外部传输资料和数据的传真机或其他电子设备。

(2)监控室和实验室内应安装语音通信系统。如果安装对讲系统,宜采用向内通话受控、向外通话非受控的选择性通话方式。

(3)通信系统的复杂性应与实验室的规模和复杂程度相适应。

10.参数要求

(1)实验室的围护结构应能承受送风机或排风机异常时导致的空气压力载荷。

(2)适用于操作通常认为非经空气传播致病性生物因子的实验室核心工作间的气压(负压)与室外大气压的压差值应不小于30Pa,与相邻区域的压差(负压)应不小于10Pa;适用于4.4.2的实验室的核心工作间的气压(负压)与室外大气压的压差值应不小于40Pa,与相邻区域的压差(负压)应不小于15Pa。

(3)实验室防护区各房间的最小换气次数应不小于12次/小时。

(4)实验室的温度宜控制在18~26℃。

(5)正常情况下,实验室的相对湿度宜控制在30%~70%;消毒状态下,实验室的相对湿度应能满足消毒灭菌的技术要求。

(6)在安全柜开启情况下,核心工作间的噪声应不大于68dB(A)。

(7)实验室防护区的静态洁净度应不低于8级水平。

四、最高防护实验室—生物安全四级实验室

生物安全防护水平为四级的实验室适用于操作能够引起人类或者动物非常严重疾病的微生物,以及我国尚未发现或者已经宣布消灭的微生物。实验室主任严格控制进入实验室。设施应在独立的建筑物内;或在建筑物的一个控制区内,但和建筑物内的其他区域完全隔离。应制定、实施特殊设施操作手册。

(一)对工作人员的要求

实验室工作人员应在处理特别危险的传染源方面受过特殊和全面的训练,应了解标准和特殊操作中一级和二级防护的作用、防护设备、实验室设计性能。实验由在有关病原方面受过训练并有工作经验的有资格的科学工作者监督。

(二)设施和设备要求

1.适用时,应符合生物安全三级实验室的要求。

2.实验室应建造在独立的建筑物内或建筑物中独立的隔离区域内。应有严格限制进入实验室的门禁措施,应记录进入人员的个人资料、进出时间、授权活动区域等信息;对与实验室运行相关的关键区域也应有严格和可靠的安保措施,避免非授权进入。

3.实验室的辅助工作区应至少包括监控室和清洁衣物更换间。适用于4.4.2的实验室防护区应至少包括防护走廊、内防护服更换间、淋浴间、外防护服更换间和核心工作间,外防护服更换间应为气锁。

4.适用于利用具有生命支持系统的正压服操作常规量经空气传播致病性生物因子的实验室的防护区应包括防护走廊、内防护服更换间、淋浴间、外防护服更换间、化学淋浴间和核心工作间。化学淋浴间应为气锁,具备对专用防护服或传递物品的表面进行清洁和消毒灭菌的条件,具备使用生命支持供气系统的条件。

5.实验室防护区的围护结构应尽量远离建筑外墙;实验室的核心工作间应尽可能设置在防护区的中部。

6.应在实验室的核心工作间内配备生物安全型高压灭菌器;如果配备双扉高压灭菌器,其主体所在房间的室内气压应为负压,并应设在实验室防护区内易更换和维护的位置。

7.如果安装传递窗,其结构承压力及密闭性应符合所在区域的要求;需要时,应配备符合气锁要求的并具备消毒灭菌条件的传递窗。

8.实验室防护区围护结构的气密性应达到在关闭受测房间所有通路并维持房间内的温度在设计范围上限的条件下,当房间内的空气压力上升到500Pa后,20分钟内自然衰减的气压小于250Pa。

9.利用具有生命支持系统的正压服操作常规量经空气传播致病性生物因子的实验室应同时配备紧急支援气罐,紧急支援气罐的供气时间应不少于60分钟/人。

10.生命支持供气系统应有自动启动的不间断备用电源供应,供电时间应不少于60分钟。

11.供呼吸使用的气体的压力、流量、含氧量、温度、湿度、有害物质的含量等应符合职业安全的要求。

12.生命支持系统应具备必要的报警装置。

13.实验室防护区内所有区域的室内气压应为负压,实验室核心工作间的气压(负压)与室外大气压的压差值应不小于60Pa,与相邻区域的压差(负压)应不小于25Pa。

14.适用于可有效利用安全隔离装置(如:生物安全柜)操作常规量经空气传播致病性生物因子的实验室,应在Ⅲ级生物安全柜或相当的安全隔离装置内操作致病性生物因子;同时应具备与安全隔离装置配套的物品传递设备以及生物安全型高压蒸汽灭菌器。

15.实验室的排风应经过两级HEPA过滤器处理后排放。

16.应可以在原位对送风HEPA过滤器进行消毒灭菌和检漏。

17.实验室防护区内所有需要运出实验室的物品或其包装的表面应经过可靠消毒灭菌。

18.化学淋浴消毒灭菌装置应在无电力供应的情况下仍可以使用,消毒灭菌剂储存器的容量应满足所有情况下对消毒灭菌剂使用量的需求。


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