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模型制备

大鼠脑血管痉挛模型

2018年10月31日 浏览量: 评论(0) 来源:《人类疾病动物模型复制方法学》 作者:周光兴 责任编辑:yjcadmin

(1)复制方法  采用经额蛛网膜下腔插管直达大脑动脉(Willis)环处2次注血制成大白鼠蛛网膜下腔出血后DCV模型。

健康大鼠,体重为200~250g,雌雄不拘,经腹腔注射水合氯醛(按350~400mg/kg体重的剂量)或戊巴比妥钠(按50~60mg/kg体重的剂量)麻醉大鼠,剃除头顶部毛发,手术区域皮肤消毒。切开头顶部中线皮肤,钝性分离肌肉及骨膜。距前囟前5mm、中线旁3mm处用电动牙科钻钻孔达脑膜,此骨孔恰好在前颅窝底与额极交接处。适当扩大骨孔,在手术显微镜下小心挑破脑膜,当清亮脑脊液流出时将PC-10塑料管尖端指向双耳连线中点、紧贴前颅底蛛网膜下腔送入,深度8~10mm(经解剖测量此长度导管顶端恰位于大脑动脉(Willis)环前部),连接注射器回抽有清亮脑脊液而无血液,提示穿刺成功。用骨蜡封闭骨创口,缝合肌肉并固定穿刺管。再于距前囟后3mm、中线旁3mm处左或右钻一骨孔,挑破脑膜,插入测量电极于皮层内(深度1mm),用于局部脑血流(rCBF)的测定。

断尾取自体血150μl经PC-10管缓慢注入蛛网膜下腔后,灼封塑料管并缝合皮肤。24h后同上述麻醉固定,剪开塑封管,再次注入自体血100μl。于末次注血6h后用生理

盐水灌冼,4%多聚甲醛灌注固定,先快后慢,断头取脑,行大体及形态学观察。也可于末次注血6h后先进行脑血管造影以观察全脑血管痉挛情况。方法:麻醉后切开颈部皮肤,分离颈总动脉,经颈内动脉插管至颅底,注入60%泛影葡胺1ml进行全脑造影。

(2)模型特点  rCBF测定显示局部血流量明显降低。大体观察可见大量血液积聚于大脑动脉(Willis)环处,大脑前中动脉、基底动脉均被陈旧性血凝块包裹,前颅窝底、蝶鞍及后颅窝处均有陈旧性血凝块残留。微血管形态学观察可见微血管管径缩小。图像分析可见血管总面积、血管数及平均血管面积均明显降低。

(3)比较医学  目前对DCV产生的机制有诸多观点,但多倾向于是一种功能改变而非结构改变。由于进行灌注固定时灌注压、pH值、理化因素等对大动脉的影响,观察大动脉的病变并不一定能真实地反映DCV的改变。以微血管的改变来反映DCV比大脑动脉环周围大血管的改变来反映更可靠。经小脑幕上蛛网膜下腔直达大脑动脉环周围的直接注血法更加真实地模拟了SAH的病理过程,且操作简单,出血易于控制,是一个较为可靠的SAH模型。由于该模型可重复性好,适用于DCV的研究。

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